山東液相色譜系統(tǒng)的固定相和分離條件的選擇
點(diǎn)擊次數(shù)：1852 更新時(shí)間：2018-08-24
山東液相色譜系統(tǒng)與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合，HPLC 所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能，能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展，有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。
山東液相色譜系統(tǒng)固定相：
1、載體：
（1）表面多孔型載體：由直徑為30～40um的實(shí)心玻璃球和厚度為1～2um的多孔性外層組成。
（2）全多孔型載體：由硅膠和硅藻土等材料制成的直徑為30～50um的多孔型顆粒。
（3）全多孔型微粒載體：由納米級(jí)的硅膠微粒堆積而成，又稱堆積硅珠。載體粒度為5～10um，由于顆粒小，所以柱效高，是目前使用廣泛的一種載體。
2、固定液：
采用化學(xué)鍵合固定相。
3、柱填充技術(shù)：
（1）干法填充：適合直徑大于20um的填料。
（2）濕法填充：高壓勻漿填充。
山東液相色譜系統(tǒng)分離條件的選擇
一、減小柱內(nèi)展寬：
1、固定相：選用粒徑小、分布均勻的球形固定相?；瘜W(xué)鍵合相，勻漿法裝柱。
2、流動(dòng)相：選用低粘度的流動(dòng)相，有利于增大組分在溶劑中的擴(kuò)散系數(shù)，減少傳質(zhì)阻力。
3、流速：約1mL/min。
4、柱溫：25℃左右。
二、減少柱外展寬：
1、柱前展寬：主要由進(jìn)樣引起，減小進(jìn)樣器的死體積。
2、柱后展寬：主要由接管、檢測(cè)器流通池體積和檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間等引起。
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